描述

细胞慢病毒整合拷贝检测

【项目介绍】

慢病毒载体（Lentiviral vectors，LV）因其高效转导能力与可稳定整合入宿主基因组的优势，已成为科研实验、细胞模型构建以及体外基因治疗研究中的重要工具。在基因治疗领域，慢病毒载体凭借高稳定性与广泛适用性，逐渐成为体外细胞治疗中主流的基因递送载体在基因治疗中，使用的慢病毒载体在生产和转导中都要受到精确的监控，如转导后的剂量检测。这里的载体剂量不仅指经基因修饰的治疗细胞数量，还包括稳定整合的病毒载体拷贝数（Vector Copy Number, VCN）。VCN能够直接反映病毒在靶细胞中的转导水平，能够准确评估基因“递送效率”与“治疗效力”，已成为基因治疗安全性评估与疗效判断过程中必不可少的核心指标。

本项目采用数字PCR（ddPCR）定量技术，对慢病毒整合序列进行精准拷贝数分析。检测靶点慢病毒核心结构区域，并以宿主单拷贝基因作为内参进行严格校准，实现对慢病毒整合载体拷贝数（VCN）的绝对定量。客户仅需提供细胞或基因组样本，我们凭借经验丰富的技术团队、严格的质量控制体系，快速产出清晰可靠的检测结果。

【检测对象】

各类慢病毒稳定转导的细胞样本

• 人源或动物源细胞系（293T、HeLa、CHO、HUVEC等）
• 原代细胞、干细胞（MSC、iPSC等）
• CAR-T/T细胞等免疫细胞

【适用范围】

• VCN定量检测

数字PCR绝对定量慢病毒载体的整合拷贝数，判断病毒在靶细胞内的真实整合水平。

• 细胞药物质量控制

验证基因修饰细胞是否满足药物研发、细胞制备、申报文件中的VCN要求（如VCN ≤5）

• 工艺优化与病毒转导效率评估

用于优化MOI、感染体系、转导条件，提高构建稳定细胞系的效率。

【合作方式】

客户可提供细胞样本（冻存细胞/活细胞≥80%存活）、基因组DNA（≥50 ng，总量≥50 μL）。

运输方式：

• 冻存细胞：干冰运输
• 活细胞：室温快递运输（避免剧烈震荡）
• 基因组DNA：4℃运输

【检测实例】

细胞名称	整合拷贝数
慢病毒整合过的293T单克隆细胞	VCN分别为10、3、1

ddPCR检测单克隆细胞株（蓝色荧光为病毒靶点，绿色荧光为内参）

ⅱ)B10 ；ⅲ)C10；ⅳ)G5

结论：此三株单克隆细胞VNC检测值分别为10、3、1